> ÀÎüÀ¯·¡ ¸ñÂ÷
-
¾ÏÀ̶õ?
- º¸Åë ¡®Á¾¾ç(tumor)¡¯ À̶ó°í ÇÏ¸é ½Åü Á¶Á÷ÀÇ Á¶ÀýµÇÁö ¾Ê´Â °úÀ×¼ºÀåÀ¸·Î ÀÎÇØ ºñÁ¤»óÀûÀ¸·Î ÀÚ¶ó³ Á¶Á÷ µ¢¾î¸®¸¦ ÀǹÌÇÑ´Ù. ½Åü¸¦ ±¸¼ºÇÏ´Â °¡Àå ÀÛÀº ´ÜÀ§ÀÎ ¼¼Æ÷(cell)´Â Á¤»óÀûÀ¸·Î´Â ¼¼Æ÷ ÀÚüÀÇ Á¶Àý ±â´É¿¡ ÀÇÇØ ºÐ¿ ¹× ¼ºÀåÇϰí, ¼ö¸íÀÌ ´ÙÇϰųª ¼Õ»óµÇ¸é ½º½º·Î »ç¸ê(Á×¾î ¾ø¾îÁü)ÇÏ¿© Àü¹ÝÀûÀÎ ¼öÀÇ ±ÕÇüÀ» À¯ÁöÇÑ´Ù.
±×·¯³ª ¿©·¯ °¡Áö ¿øÀÎ(À¯ÀüÀÚ µ¹¿¬º¯ÀÌ µî)¿¡ ÀÇÇØ ÀÌ·¯ÇÑ ¼¼Æ÷ ÀÚüÀÇ Á¶Àý ±â´É¿¡ ¹®Á¦°¡ »ý±â¸é Á¤»óÀûÀ¸·Î´Â »ç¸êÇØ¾ß ÇÒ ºñÁ¤»ó ¼¼Æ÷µéÀÌ °ú´Ù Áõ½ÄÇÏ°Ô µÇ¸ç, °æ¿ì¿¡ µû¶ó ÁÖÀ§ Á¶Á÷ ¹× Àå±â¿¡ ħÀÔÇÏ¿© Á¾±«(µ¢¾î¸®)¸¦ Çü¼ºÇÏ°í ±âÁ¸ÀÇ ±¸Á¶¸¦ ÆÄ±«Çϰųª º¯Çü½Ã۴µ¥, ÀÌ·¯ÇÑ »óŸ¦ ¾Ï(cancer)À¸·Î Á¤ÀÇÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
¾ÏÀÇ ¿øÀÎ?
- ÈÇй°Áú, ¹°¸®Àû ÀÚ±Ø, ¹ÙÀÌ·¯½º, È£¸£¸ó, À¯ÀüÀû ¿äÀÎÀÌ ÀÖ´Ù.
¼¼Æ÷ÁÖ´Â ¹«¾ùÀΰ¡?
- µ¿ÀÏÇÑ °³Ã¼¿¡¼ À¯·¡µÈ À¯ÀüÀÚ ±¸¼ºÀÌ °°Àº ¼¼Æ÷ Áý´ÜÀ̸ç ÀΰøÀûÀ¸·Î ¹è¾çÇÑ ÇϳªÀÇ ¼¼Æ÷·ÎºÎÅÍ ºÐ¿ Áõ½ÄÀ» ÇÑ °á°ú·Î »ý±ä´Ù. ÀϹݼ¼Æ÷´Â ½ÃÇè°ü³»¿¡¼ 10¹ø ÀÌ»ó ºÐ¿ÇÏ¸é »ýÁ¸ÇÒ ¼ö ¾øÀ¸³ª, ¼¼Æ÷ÁÖ´Â ¹«ÇÑÁ¤ÇÏ°Ô ºÐ¿ÇÏ¸ç ¼ºÀåÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù. À̸¦ ÅëÇØ¼ ¸¹Àº ÀÇ»ý¸í¿¬±¸¿¡¼´Â °¢Á¾ Áúº´ÀÇ ¿øÀÎÀ» ¿¬±¸ÇÑ´Ù. ƯÈ÷ ¾Ï ¿¬±¸ÀÇ °æ¿ì ¾Ï¼¼Æ÷¸¦ ƯÀÌÀûÀ¸·Î »ç¸ê½Ãų ¼ö ÀÖ´Â ¹æ¹ý µîÀ» °³¹ßÇÏ´Â »õ·Î¿î Ç×¾ÏÁ¦µîÀÇ °³¹ß ±×¸®°í ±âÁ¸ ½Å¾àÀÇ ¾àÁ¦ ÀúÇ×¼ºÀ» ¿¬±¸ÇÏ´Â ºÐ¾ß¿¡ »ç¿ëµÇ°Ô µÈ´Ù. À̻Ӹ¸ ¾Æ´Ï¶ó ¸¹Àº »ý¸í°úÇÐ ºÐ¾ßÀÇ Å« ÀÚ¿øÀ¸·Î ÀÌ¿ëµÈ´Ù.

ÁøÇÙ¼¼Æ÷¿Í ¿øÇÙ¼¼Æ÷ÀÇ Â÷ÀÌÁ¡ ¹× ¼¼Æ÷³» ¼Ò±â°ü ±â´É

±â´É¼¼Æ÷¼Ó À¯ÀüÁ¤º¸¸¦ ´ã°í ÀÖ´Â À¯ÀüÀÚ(DNA)
- ºÎ¸ð¿¡¼ ÀÚ½ÄÀ¸·Î ¹°·ÁÁö´Â Ư¡, Áï ÇüÁúÀ» ¸¸µé¾î ³»´Â ÀÎÀڷμ À¯Àü Á¤º¸ÀÇ ´ÜÀ§ÀÌ´Ù. ±× ½Çü´Â »ý¹° ¼¼Æ÷ÀÇ ¿°»öü¸¦ ±¸¼ºÇÏ´Â DNA°¡ ¹è¿µÈ ¹æ½ÄÀÌ´Ù.
DNA´Â ³ª¼±±¸Á¶¸¦ ÀÌ·ç´Â »À´ë(Backbone chain)¿Í ¿°±â(Nucleobase)·Î ±¸¼ºµÇ¾î ÀÖ´Ù. »À´ë´Â ´Ü´ç·ùÀÎ µð¿Á½Ã¸®º¸¿À½º(Deoxyribose)¿¡ Àλê±â(Phosphate)°¡ °áÇÕµÇ¾î ±ä »ç½½°ú °°Àº ÇüŸ¦ ¶ì°í ÀÖ´Ù. DNA°¡ ÀÌÁß³ª¼±À» ÀÌ·ç°í ÀÖÀ» ¶§, °¢°¢ÀÇ Ç»¸°Àº ÇϳªÀÇ ÇǸ®¹Ìµò°ú ¼ö¼Ò °áÇÕÀ» ÅëÇØ °áÇÕÇÑ´Ù. ÀÌ·¯ÇÑ ¿°±â½Ö³¢¸®ÀÇ °áÇÕÀ» DNAÀÇ »óº¸¼ºÀ̶ó°í ºÎ¸¥´Ù. ÀÌ·¯ÇÑ »óº¸¼ºÀº DNAÀÇ Á¤º¸ ÀúÀå, º¹Á¦, Àü»ç µî¿¡ °ü¿©ÇÑ´Ù.
-
¾Ï¼¼Æ÷ °üÂûÇϱâ
- ½ÇÇèÀç·á: ¾Ï¼¼Æ÷ÁÖ, Çö¹Ì°æ, ¹èÁö ¿ø½ÉºÐ¸®±â, Heat block, DNA ÃßÃâ½Ã¾à
- - ¾Ï¼¼Æ÷ÁÖ:
À§¾Ï¼¼Æ÷ÁÖ(SNU-16, AGS), ´ëÀå¾Ï¼¼Æ÷ÁÖ (SNU-C4), ÀڱðæºÎ¾Ï¼¼Æ÷ÁÖ (Hela), ³ú¾Ï¼¼Æ÷ÁÖ (SNU-1118)
- - ¹èÁö: RPMI1640+10%FBS


- ½ÇÇè¹æ¹ý
- Çöó½ºÅ©¿¡ ÁغñµÈ ¿©·¯ Á¾·ùÀÇ ¾Ï¼¼Æ÷ÀÇ ¸ð¾çÀ» Çö¹Ì°æÀ¸·Î °üÂûÇÏ°í ¼¼Æ÷¹è¾ç¿ë±â(flask)¿¡ ¹è¾ç¾×À» ³Ö¾îº»´Ù.
Hela ¼¼Æ÷¿¡¼ DNA ÃßÃâÇϱâ
- ½ÇÇèÀç·á:
- ¾Ï¼¼Æ÷ÁÖ, ¿ø½ÉºÐ¸®±â, Heat block, DNA ÃßÃâ½Ã¾à, ¼¼Æ÷ ¿ÏÃæ¾×(PBS), ¼¼Æ÷¸· Á¦°Å½Ã¾à(Cell lysis buffer), RNA Á¦°Å½Ã¾à(RNaseA solution), 1.5ml Æ©ºê(EP tube), ¾ÆÀ̼ÒÇÁ·ÎÆÄ³î(Isopropanol), 70% ¿¡Åº¿Ã(EtOH), DNA ¿ÏÃæ ½Ã¾à(DNA rehydration buffer)
- ½ÇÇè¹æ¹ý
-
1. [¼¼Æ÷ Áغñ ´Ü°è] Áõ½Ä½ÃŲ Hela cell¸¦ 1~2¡¿106°³(10¸¸~20¸¸ °³) ÁغñÇÏ¿© PBS·Î ¾Ä¾îÁØ´Ù.
2. [¼¼Æ÷ ÅÍÆ®¸®±â ´Ü°è] Cell lysis buffer 150¥ìl¸¦ ³Ö¾îÁØ´Ù.
3. [RNA Á¦°ÅÇϱâ] RNaseA solution 1¥ìl¸¦ ³Ö°í 37¡ÆC (Heat block)¿¡¼ 15ºÐ°£ RNA¸¦ Á¦°ÅÇÑ´Ù.
4. [´Ü¹éÁú Á¦°ÅÇϱâ] PPT buffer 50¥ìl ³Ö¾îÁÖ°í 20ÃÊ ¼¯¾îÁÖ°í, ¾óÀ½¿¡¼ 5ºÐ°£ µÎ¾ú´Ù°¡ 3ºÐ°£ ¿ø½ÉºÐ¸® ÇÑ´Ù.
5. [DNA ³óÃà´Ü°è] »óÃþ¾×À» »õ EP tube·Î ¿Å±â°í, 150¥ìl IsopropanolÀ» ³Ö°í Æ©ºê¸¦ Èçµé¾î DNA¸¦ ´«À¸·Î
È®ÀÎÇÑ´Ù.
6. 1,4000rpm¿¡¼ 3ºÐ°£ ¿ø½ÉºÐ¸®ÇÑ´Ù.
7. »óÃþ¾×À» Á¦°ÅÇϰí, 70% EtOH 200¥ìl¸¦ ³Ö¾îÁØ´Ù.
8. ´Ù½Ã 1,4000rpm¿¡¼ 3ºÐ°£ ¿ø½ÉºÐ¸®ÇÑ´Ù.
9. »óÃþ¾×À» ¹ö¸®°í ¹Ù·Î Ƽ½´ À§¿¡ °Å²Ù·Î ³õ´Â´Ù.
10. [DNA ³ìÀ̱â] DNA rehydration buffer 150¥ìl¸¦ ³Ö´Â´Ù.
11. [DNA ³óµµ ÃøÁ¤Çϱâ] ³óµµ¸¦ È®ÀÎÇÏ°í ½ÇÇè¿¡ »ç¿ëÇÑ´Ù.
